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[사용 메뉴얼]CROWNPAK® CR-I(+), CROWNPAK® CR-I(-) Column
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CROWNPAK® CR-I(+), CROWNPAK® CR-I(-) Column 사용 설명서
컬럼 사용 전에 반드시 사용 설명서를 읽어 주시기 바랍니다.
Column description
Shipping solvent: H2O/MeOH (95:5 v/v)
칼럼은 포장 전에 선 테스트 후 출고됩니다. 칼럼 lot number, 테스트 인자 및 결과는 동봉된 성적서에 기재되어 있습니다.
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본 사용설명서는 다른 DAICEL Column에 적용할 수 없습니다. |
Chiral recognition
CROWNPAK® CR-I , CROWNPAK® CR-I(-) 컬럼의 키랄 인지는 산 조건하에서 crown ether와 암모니아 이온 사이에 일시적인 착물을 형성하므로 발생합니다. 아미노산 및 1차 아미노작용기를 가지고 있는 화합물이 분리됩니다. CROWNPAK® CR-I(+)은 항상 D-form이 먼저 용출되고 CROWNPAK® CR-I(-)는 그와 반대되는 용출 순서를 나타냅니다.
Operating Instructions
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3.0 x 150 mm Analytical columns | |
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Flow rate direction |
As indicated on the column label |
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Typical Flow rate |
0.2~0.4 mL/min |
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Pressure limitation① |
Should be maintained < 300 Bar (430 psi) for maximum column life Adapt flow rates to column size. |
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Temperature |
-5 to 40°C |
①컬럼에 가해지는 압력은 시스템+컬럼에 가해지는 압력과 시스템 자체에서 걸리는 압력 차를 의미합니다. 즉 컬럼에만 가해지는 압력입니다.
Operating procedure/Reversed phase
A – 이동상
CROWNPAK® CR-I , CROWNPAK® CR-I(-)은 일반적으로 HPLC 분석에 사용되는 용매라면 어떤 용매든 선택하실 수 있습니다. 분석법 개발시 역상 조건을 먼저 사용하실 것을 추천 드립니다.
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Aqueous solution ① |
HClO4 aqueous solution |
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Organic solvent② |
CH3CN, MeOH, EtOH, IPA, THF, AT |
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Typical starting conditions③ |
Aqueous solution of HClO4 (pH = 1.5)/CH3CN= 80/20 (v/v) |
CH3CN: Acetonitrile, MeOH: Methanol, EtOH: Ethanol, IPA: 2-Propanol, THF: Tetrahydrofuan, AT:Acetone
①- 이동상의 pH 범위: pH 1~ pH 2 ( pH 7까지 컬럼은 안정적임)
낮은 pH에서는 좀 더 긴 머무름을 확인할 수 있으나 컬럼의 수명이 짧아집니다. 따라서 적절한 분리가 가능한 높은 pH 선택하시는 것이 컬럼의 수명을 연장할 수 있는 방법입니다.온도가 낮추는 것 역시 컬럼의 선택성을 높일 수 있는 방법입니다.질산, TFA와 같은 산이 사용될 수는 있습니다. 하지만 DAICEL 사에서는 perchloric acid를 사용하는 것은 추천드립니다. 대부분의 경우 높은 분리능을 나타내며, 낮은 UV흡광도는 가지고 있습니다.
② -CROWNPAK® CR-I , CROWNPAK® CR-I(-) 유기용매의 용출세기는 다음과 같습니다.
CH3CN>AT> THF> IPA> EtOH>MeOH
-알코올의 사용은 CH3CN과 비교하여 Back pressure를 높게 할 가능성이 높습니다 이는 알코올이 물과 섞이면서 점도가 증가하기 때문입니다.
③ -수용액은 반드시 사용하기 전에 0.5μm 멤브레인 필터를 이용하여 침전물이 남아 있지 않도록 필터 하여 사용합니다.
-머무름은 유기용매 비율에 따라 조절할 수 있습니다.
B– Examples of mobile phase preparation
아래는 이동상 제조 방법에 대해 설명했으며, 정확한 pH 측정을 위해서는 반드시 pH 미터기를 사용하여 조절하도록 합니다.
a) pH =1.0
16.3 g의 70% perchloric acid를 1리터가 되도록 물로 희석하여 제조합니다.
b) pH =2.0
100 mL의pH 1 perchloric acid를 1리터가 되도록 물로 희석하여 제조합니다.
c) pH =1.5
316 mL의pH 1 perchloric acid를 1리터가 되도록 물로 희석하여 제조합니다.
d) pH =1.3
500 mL의pH 1 perchloric acid를 1리터가 되도록 물로 희석하여 제조합니다.
Note
-이동상은 반드시 헬륨 퍼지와 같은 방법으로 탈기하여 사용하도록 합니다.
-용량인자는(capacity factors)는 샘플의 소수성인지 아닌지에 따라 영향을 받습니다.
-소수성 화합물은 친수성 화합물에 비하여 상대적으로 머무름이 큽니다.
분석 중 샘플의 머무름이 짧거나 분리능이 떨어진다면 이동상의 pH,컬럼 온도를 감소할 경우 개선될 수 있습니다.
-본 컬럼은 k+ 이온에 의해 컬럼 손상을 받지 않습니다. 다만 k+이온이 존재할 경우 키랄 인지에 영향을 줄 수는 있습니다. 따라서 k+이온이 포함된 이동상은 사용하지 않는 것이 바람직합니다.
Column care / Maintenance
▣ Column life 극대화를 위해 가드 카트리지 사용을 꼭 해 주세요
▣ 샘플은반드시이동상에녹인후0.5μm membrane filter를 사용하여 여과하여 주입하시기 바랍니다.
▣ 높은 농도의 샘플을 주입할 경우 컬럼 효율이 낮아지게 됩니다.
▣ 세척이 필요할 경우, 컬럼 충진제 내에 흡착되어 샘플을 녹일 수 있는 메탄올 혹은 아세토니트릴로 실온에서 대략 2시간 동안 0.2mL/min 속도로 흘려줍니다.
▣ 사용 후 컬럼과 카드 필더는 즉시 산이 첨가되지 않는 이동상으로 흘려주도록 합니다.
▣ 역상 조건에서 계속해서 사용할 경우 H20/MeOH=95/5로 채워 준 뒤 보관합니다.
Important Notice
▣ 이 사용 설명서는 CROWNPAK® CR-I , CROWNPAK® CR-I(-) 에만 해당됩니다.
▣ 사용시 문의 사항이 있으실 경우 씨티케이 기술연구소로 문의주기 바랍니다. (ctk@ct-k.com)
가이드라인에 따라 컬럼을 사용하시면 컬럼 수명을 길게 연장할 수 있습니다.
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